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通过直接再生途径,侧芽和不定芽从初始外植体长出并进一步形成分支"以往的研究证明,MS基质对于桑树芽增殖是适宜的,但对于较老的外植体,LS基质中的维生素并结合活性炭可以避免其出现褐化"自1976年以来在对M.alba组织培养体系的研究中,蔗糖一直是芽增殖的首选炭源"SueoEnomoto证实3%果糖虽然可以在初代培养中促进芽的萌发,但仍需转入添加蔗糖的继代培养基促进芽生长"在添加了麦芽糖的培养基上进行培养,只能从叶子的叶腋部诱导出芽,但并没有显现出增殖反应以及芽的进一步生长[sl"在对献劲心caL.和卫时baL.的研究中,培养在添加了葡萄糖的MS基质上的芽则先呈现浅绿色玻璃化状态而后枯萎死亡7.-,〕"6一BA(0.5一2.0mg/1)可以高效的从顶芽,侧芽和茎段诱导芽增殖〔司"1.0mg/l6-BA对于芽的诱导及伸长是最适的t下#吕〕"6一BA与其他激素相比在试管内诱导芽增殖方面的优势也体现在桑树以外的其他植物中,例如Oeimumsanerum,RosmariusOfficinalis,Arachis切ogae"和AI矛,pabelladona〔7〕口6一BA作为首选的原因是相对于其他的合成生长调节剂6一BA代谢更稳定"但是如选择叶,胚轴或子叶作为外植体诱导不定芽,则TDZ被证实比6一BA更适合,但同时在促进茎伸长方面不如6一BA有效,所以在继代过程中仍需转移到含6一BA的培养基中促进茎仲长。
大部分桑树微繁的研究集中在以顶芽,侧芽和茎段作为外植体的直接器官发生,并且已经在很多种获得了完整的试管再生植株,例如,证打ba,麒j"/z.二,麒b朋b少cz.s以及麒了"eVI召五t""1981年,oka&Ohyama证实了不通过中间愈伤组织形成阶段,以桑叶作为外植体可以直接诱导不定芽形成"同一时期,出现了从子叶和胚轴外植体诱导茎器官再生体系的报道"尽管关于桑树组织培养的报道已有很多,但是具有不同遗传特异性的品种对相同培养条件的反应仍不相同"除了生长调节剂和外植体类型,外植体的树龄对芽增殖能否成功也有重要影响"现已证实,增加BA的用量对于树龄超过十年的树木能显著提高芽繁殖率"对于树龄较长且单独使用6一BA茎不能延长的芽,在接种到添加6一BA(l.0mg/1)和GA::(0.5一1.0mg/1)的Ms培养基进行继代后能促进其延长〔.幻"针对不同种的培养材料,季节对侧芽萌发也有较大影响,季节导致的差异在试管培养和扦插中都存在"四月到九月之间取得的外植体比十月到来年三月间采集的外植体"从试管内繁殖的茎上取得的茎段和茎尖比从农田中取得的外植体具有更高的增殖率。
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