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生长素和细胞分裂素的浓度和比例对植物组织培养形态发生过程起决定作用,既决定了细胞发育的类型也决定了外植体的再分化方向"其中细胞分裂素有利于促进芽的分化和增殖,而生长素则有利于促进根的分化"以往对于多个品种桑组织培养的研究证实,6一BA是诱导芽增殖的有效细胞分裂素"本实验将1月份取样的冬芽接种于添加6一BA的培养基后两周,冬芽的展叶率>50%。结果表明,6一BA对于诱导/龙桑一号冬芽的侧芽增殖也是有效的"虽然单独使用6一BA能够使冬芽启动,但三周后抽茎率为10%左右"因此,单独使用6一BA对于茎的伸长和腋芽的增殖不利"在得出6一BA最适浓度的基础上,联合使用6一BA和NAA,进一步促进了冬芽抽茎"添加NAAO.Zmg/1使茎的长度在四周后达到SCm左右"虽然添加NAA能够促进茎伸长,但茎的伸长与NAA和6一BA的比例无明显关系"。
除了冬芽的启动和茎的伸长情况,褐化和玻璃化也是影响冬芽增殖生长的重要因素"虽然不同激素浓度和配比对外植体褐化无明显影响,但随6一BA浓度增加,当6一BA浓度达到Zmg/1,玻璃化率显著增高"本实验在综合考虑冬芽的启动,外植体的褐化,及茎的伸长和腋芽增殖等因素后,得出诱导冬芽分化的最适培养基为:在以茎段为外植体诱导腋芽增殖的实验中,首先选取KT与6一BA诱导茎段的腋芽增殖"对比接种于单独添加KT与6一BA的培养基中的茎段的腋芽分化率,证实6一BA比KT能更有效的启动/龙桑一号0茎段腋芽增殖,且6一BA1.Om动比6一BAo.sm幼更容易使腋芽启动。
以往研究表明,在桑组织培养的芽增殖阶段,GA3能够促进茎段的伸长"本实验联合使用了6一BA及GA3"结果证实,较单独使用6一BA,联合使用6一BA及GA:能够更有效的促进茎段的仲长,进而有利于腋芽增殖"但接种于添加了6一BA及GA3培养基中的茎段与未添加GA3培养基的茎段相比,虽然腋芽的节间距明显增加但展叶情况不如对照组"。
除激素外,无机盐浓度也是影响茎段腋芽增殖的重要因素"WPM较MS培养基更适合诱导茎段腋芽增殖和分化,推测与WPM培养基能够降低褐化率有关"接种于WPM培养基中茎段的褐化率为40一60%,而接种于MS培养基中茎段的褐化率为60-80%"由上述结果得出,茎段诱导腋芽增殖的最适培养基为:WPM+6一BAl刀m幼+GA30.sm留l"接种于不同培养基的茎端腋芽增殖的启动时间一致,为接种后三周"。
与冬芽腋芽启动的时间相比,茎端的腋芽晚一周左右"虽然褐化的冬芽仍能启动芽增殖,但褐化的茎段未启动腋芽增殖,并随着培养时间的延长失去增殖活性2#/龙桑一号0组织培养的研究。
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